ge离子交换层析柱protocol

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摘要:GE离子交换层析柱protocol5ml（举例子）Preparation1.Buffer:（pH根据蛋白的pI进行调整，pH尽量远离pI。pH>pI,过Q柱；pH>pI,过S柱）A:50mMTris-HClB:50mMTris-HCl1MNaCl过滤除杂质，4℃静置过夜除气泡。2.Protein:用滤器过滤除质；或者分装于EP管，14000rpm，4℃离心20min，去除沉淀。3.Prepareenoughtubes有流速时，禁止将泵的探头暴露到空气中!!!Procedure柱子在仪器上时，无论何时均要限压!!!1打开仪器总开关，电脑。检查：泵的探头是否放入纯水中。洗泵：Manual--pump--pumpbasicwash--Aon,Bon--insert--execute洗系统：Manual--pump--flow--10ml/min--insert--executeManual--other--Endtime--volume--40ml2安装柱子给流速：Manual--pump--flow--3ml/min--insert--execute(仪器显示系统压力为Mpa)限压力：Manual--Alarms--Alarmspressure--+)Mpa--insert--execute是HitrapQ柱子的最大限压)装柱子：先装上面，再下面，装完后用纸巾擦干，观察是否漏液。3清洗柱子限压力：Manual--Alarms--Alarmspressure--+*)Mpa--insert-execute给流速：Manual--pump--flow--1

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